Для визначення нікотину та його метаболітів у сечі можуть бути використані різні методи: газова хроматографія/мас-спектрометрія (ГХ/МС), рідинна хроматографія/мас спектрометрія (РХ/МС), радіоімунний аналіз, імуноферментний аналіз та інші.
Безпосередньо після куріння нікотин виявляється в сечі через кілька годин (близько 7), його основний метаболіт – котинін виводиться повільніше, його виявлення може досягати кілька днів. У барбітуратів основними фармакологічними ефектами є заспокійливий, протисудомний, снодійний.
Для оцінки рівня споживання тютюну досліджують концентрацію нікотину та його метаболітів. Нікотін та його метаболіти можуть бути досліджені в крові, слині, сечі, а також придатках шкіри (волосся та нігті).